Propagación in vitro de plantas de Pinus cubensis Griseb.

Raima Cantillo Ardebol, Janet Igarza Castro, Ana María Ochoa

Resumen


La micropropagación de plantas del género Pinus se ha realizado en varias especies. Sin embargo, no se han informado trabajos sobre micropropagación de Pinus cubensis Griseb., especie de gran importancia económica. En consecuencia se propone como objetivo lograr la propagación in vitro Pinus cubensis Griseb. para contribuir al aumento del número de individuos en su hábitat natural. Para la desinfección de las semillas y el establecimiento de los embriones se determinó la concentración y el tiempo de inmersión en hipoclorito de sodio así como el efecto de la presencia o ausencia de la cubierta seminal. En la fase de multiplicación se ensayaron dos reguladores de crecimiento y tres concentraciones de cada uno para lograr la emisión de brotes axilares. Se realizaron cinco subcultivos cada 21 días. El enraizamiento y la aclimatización se realizaron simultáneamente. Los brotes se individualizaron y se sumergieron en una solución enraizadora. Se logró el establecimiento in vitro de embriones cigóticos de P. cubensis. Los mayores porcentajes de desinfección y germinación se obtuvieron después de la inmersión de las semillas en una solución de hipoclorito de sodioal 20% durante 15 minutos, seguida de su siembra sin cubierta seminal. Con el uso de 22.5 µM de 6-bencilaminopurina y 5.4 µM de ácido naftalenacético se incrementó el número y la longitud de los brotes axilares en la fase de multiplicación. Fue posible propagar in vitro por primera vez Pinus cubensis Griseb. a partir embriones cigóticos y se estableció un protocolo de trabajo donde las plantas obtenidas alcanzaron un 50% de supervivencia en la fase de aclimatización.

Palabras clave: aclimatización, brotes axilares, forestales, multiplicación, pino


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Referencias


Andersone, U, Ievinsh G (2002) Changes of Morphogenic Competence in Mature Pinus sylvestris L. L. buds in vitro. Annals of Botany 90: 293-298

Betancourt, A (1987) Silvicultura especial de árboles maderables tropicales. Ed. Científico-técnica, La Habana. Cuba

Caboni, E, Angeli SD, Chiappetta A, Innocenti AM, Van Onckelen H, Damiano C (2002) Adventitious shoot regeneration from vegetative shoot apices in pear and putative role of cytokinin accumulation in the morphonenetic process. Plant Cell Tissue and Organ Culture 70: 199-206

Calixto, S, Salomé H (1997) Adventitious shoot formation and plant regeneration from Pinus pinaster Ait. Sol ex Aiton. In Vitro Cell. Dev. Biology Plant 33:119-124

David, A, Laine E, David E (1995) Somatic Embryogenesis in Woody Plants. En: Jain SM, Gupta PK, Newton RJ (Eds.), pp. 221-242. Kluwer Academic Publishers, Dordrecht

Del Pozo, JC, López-Mata MA, Ramírez-Parra E, Gutiérrez C (2005) Hormonal control of the plant cell cycle. Physiologia Plantarum 123:173-183

Fosquet, DE, Morejhon LC, Westerling (1981) Control of growth by cytokinin: An examination of tubuline synthesis during cytokinin-induced growth in cultured cell of Paul’s scarlet rose: En: Guern D, Peaud-Leonel C (Eds) Metabolism and molecular activity of cytokinin, pp. 193-211. Springer-Verlag. Dordrecht

Gupta, P, Durzan D (2004) Shoot multiplication from mature trees of Douglas Fir (Pseudotsuga menziensii) and Sugar Pine (Pinus lambertiana). Plant Cell Reports 4(4): 177-179

Gupta, PK, Timmis RT (1999) Conifer somatic embryo production for liquid culture. En: Altman, G (Ed) Plant Biotechnology and In vitro Biology in the 21st Century, pp 49-52. Kluwer Academic Publishers. Dordrecht

Gupta, PK, Timmis RT, Timmis K, Grob J, Karlson W, Welty E (1999) Advance in coniphers technique improvement through somatic embryogenesis. Chapter 29. En: Kazno Watanabe R, Komamine A (Eds) Proceedings of the 12th Toyota Conference Challenge of Plant and agriculture Sciense to the crisis of biosphere on the earth in the 21th Century, pp. 33-39. RG Landes Co. Texas

Housa, C, Jacqmard A, Bernier G (1990) Activation of replicon origins as a possible target for cytokinin in shoot meristems of Sinapis. Planta 181: 324-326

Kalia, RK, Arya S, Kalia S, Arya I, Sharma S (2000) Plantlet production in Chir Pine through axilary bud proliferation. Peer Review Meeting. [En línea] En: http://dr.satishkant.port5.com/pineaxillary.pdf (Consultado el 12 de diciembre de 2006)

Klimaszewska, K, Park YS, Overton C, Maceacheron I, Bonga JM (2001) Optimized somatic embryogenesis in Pinus strobus L.In vitro Cel l . Dev. Biology Plants 37: 392-399

López, MC, Sánchez I (2003) Micropropagation of conifer species. Acta Horticulturae 289: Proceedings of the ISHS International Symposium on Plant Biotechnology and its Contribution to Plant Development, Multiplication and Improvement. [En línea] En: http:// www.actahort.org/books/289/289_29.htm (Consultado el 18 de marzo de 2005)

Martínez C, Harry I, Thorpe T (1994) Effect of various bud induction treatments on elongation and rooting of Canary Island Pine (Pinus canariensis). Plant Cell Tissue and Organ Culture 39: 225-230

Murashige, T, Skoog E(1962) A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue culture. Physiologia Plantarum 15: 473-497

Niella, F, Rocha P (2004) Factores que afectan la formación de brotes adventicios a partir de embriones maduros de Pinus taeda L. via organogénesis. Novenas Jornadas Técnicas Forestales. INTA-FCF-MEYRNRYT-Eldorado, Misiones, Argentina. [En línea] En: http:// www.facfor.unam.edu.ar/silvman/organoniella.pdf. (Consultado el 18 de marzo de 2005)

Ojeda, MC (1996) Inducción de organogénesis y embriogénesis som ática en Pinus cembroides (Zucc) y Pinus Halepensis Mill. (Mill). Tesis para optar al grado de Maestro en Ciencias en Producción Agrícola. Universidad Autónoma de Nuevo León. Fac. Agronomía. 58 p.

Orellana, P (1998) Introducción a la propagación masiva. En: Pérez, N. J (Ed) Propagación y mejora genética de plantas por Biotecnología, pp 50 – 51. IBP. Santa. Clara

Ríos, L, Sánchez Olate M, Decarli N, Feito D, Rodríguez F (2005) Bases moleculares del enraizamiento. En: Sánchez-Olate M, Ríos D (Eds) Biotecnología vegetal en especies leñosas de interés forestal, pp 164. Departamento de Silvicultura. Facultad de Ciencias Forestales. Universidad de Concepción, Chile

Rocha, P, Niella F (2001) Research and development of vegetative propagation techniques for Pinus s p . i n the Northeast region of Argentina. En: Jeffrey F D (Ed.) Proceedings of the 26th. Biennial Southern Forest Tree Improvement Conference. June 26-29, 2001, pp. 32-38. Dean-Georgia University. Athens

Rodríguez, R, Albuerne M, Fernández B (2005) Morfogénesis y su manipulación en especies leñosas. En: Sánchez-Olate M, Ríos D (Eds) Biotecnología vegetal en especies leñosas de interés forestal, p. 164. Departamento de Silvicultura. Facultad de Ciencias Forestales. Universidad de Concepción, Chile

Saborio, F, Dvorak William S, Donahue Jeffrey K, T h or p e Tr ev or A (1 9 97) In vitro regeneration of plantlets from mature embryos of Pinus ayacahuite Ehrenb. Tree Physiology 17 (12): 787-796

Schestibratov, K, Mikhailov R, Dolgov S (2003) Plantlet regeneration from subculturable nodular callus of Pinus radiata Don. Plant Cell Tissue and Organ Culture 72(2): 139-146

Stojicic, D, Budimir S (2004) Citokinin-mediated axillary shoot formation in Pinus heldreichii. Biologia Plantarum 48(3): 477-479

Stojicic, D, Budimir S, Culafic L (1999) Micropropagación of Pinus heldreichii. Plant Cell Tissue and Organ Culture 59:147-150

Sul, W, Korban S (2004) Effects of salt formulation, carbon sources, cytokinins, and auxins on shoot organogenesis from cotyledons of Pinus pinea L. Plant Growth Regulation 43: 197-205

Tang, W, Guo Z (2001) In vitro propagation of loblolly pine via direct somatic organogenesis from mature cotyledons and hypocotyls. Plant Growth Regulation 33(1): 25-31

Tang, W, Newton R, Charles TM (2006) Plant regeneration through multiple adventitious shoot differentiation from callus cultures of slash pine (Pinus elliottii Engelm.). Journal of Plant Physiology 163:98-101

Toribio, M, Celestino C (2000) El uso de la biotecnología en la conservación de recursos genéticos forestales. Investigaciones agrarias. Fuera de Serie 2: 249-260

Valdéz, A, Ordas R, Fernández B, Centeno, M (2001) Relationships between hormonal contents and the organogenic response in Pinus pinea L cotyledons. Plant Physiology and Biochemistry 39:377-384

von Aderkas, P, Bonga J (2000) Influencing micropropagation and somatic embryogenesis in mature trees by manipulation of phase change, stress and culture environment. Tree Physiology 20: 921-928




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