Protocolo para el aislamiento de cloroplastos intactos de hojas de plantas de Musa spp. obtenidas por cultivo in vitro y evaluación de la actividad fotosintética

Michel Leiva-Mora, Yelenys Alvarado-Capó, Mayra Acosta-Suárez, Mileidy Cruz-Martín, Cynthia Sánchez-García, Berkis Roque

Resumen


Los cloroplastos son los orgánulos de las células vegetales donde se realiza la fotosíntesis, al convertir la energía lumínica en energía química (ATP) y generar poder reductor (NADPH). El aislamiento de cloroplastos y la evaluación de la actividad fotosintética en condiciones in vitro, ha sido una tarea difícil debido a las alteraciones estructurales y funcionales que sufren los cloroplastos y a la presencia de fracciones celulares contaminantes. En el presente trabajo se propone un protocolo para el aislamiento de cloroplastos de hojas de bananos, así como un procedimiento para la evaluación de la actividad fotosintética de dicha suspensión. En él se resumen los principales reactivos, soluciones, materiales biológicos, equipos, y condiciones necesarias para reproducirlo en condiciones de laboratorio. Finalmente, se sugieren diversas aplicaciones que puede tener el presente protocolo en el campo de la enseñanza e investigación científica relacionada con la biotecnología vegetal.

Palabras clave: 2,6-diclorofenolindofenol, equivalentes reductivos, fotosíntesis, reactivo de Hill


Texto completo:

PDF HTML

Referencias


Barcelo, CJ, Sabater GB, Nicolás RG, Sánchez TR (2007) Cloroplastos. En: Barceló Coll J (Ed) Fisiología vegetal, pp. 155-156. Pirámide. Madrid

Busogoro, JP, Etame JJ, Harelimana G, Lognay G, Messiaen J, Lepoivre P, Van Cutsem P (2004) Experimental evidence for the action of M. fijiensis toxins on banana photosynthetic apparatus. En: Mohan SJ y Swennen R (Ed) Banana improvement:

cellular, molecular biology, and induced mutations, pp.161-170. Enfield. Science Publishers

Goltsev, V, Tsimilli-Michael M, Chernov P, Zaharieva I, Kouzmanova M, Strasser JR (2008) Electromagnetic frequency spectra of samples placed in a coil that senses the electromagnetic background field: Application for leaves, chloroplasts and molecules useful in photosynthesis. En: Allen JF, Gantt E, Golbeck JH, Osmond B (Ed) Photosynthesis. Energy from the Sun, 14th International Congress on Photosynthesis, pp. 591-595. Springer. Dordrecht

Kosky, RG, Del Sol L, Reyes VM, Freire-Seijó M, Posada-Pérez L, Herrera I, Escalant JV (2001) Embriogénesis somática en bananos y plátanos partiendo de flores masculinas inmaduras. Biotecnología vegetal 1(1): 29-35

Kozuleva, AM, Ivanov NB (2010) Evaluation of the participation of ferrodoxin in oxygen reduction in the photosynthetic electron transport chain of isolated pea thylakoids. Photosynthetic research105: 51-61

Mehler HA (1951) Studies on reactions of illuminated chloroplasts I. Mechanism of the reduction of oxygen and other hill reagents. Archives of Biochemistry and Biophysics 33(1): 65-77

Orellana P (1994) Tecnología para la micropropagación in vitro de clones de Musa ssp. Tesis para aspirar por el grado científico de Doctor en Ciencias Agrícolas. UCLV. IBP. Santa Clara. 120p

Sauer, K, Park BR (1965) The Hill Reaction of Chloroplasts. Action Spectra and Quantum Requirements Biochemistry 4(12): 2791–2798




Copyright (c) 2016 Biotecnología Vegetal

Biotecnología Vegetal eISSN 2074-8647, RNPS: 2154. ISSN 1609-1841, RNPS: 0397 Editada por: Instituto de Biotecnología de las Plantas. Universidad Central Marta Abreu de Las Villas. Carretera a Camajuaní km 5.5, Santa Clara, Villa Clara, Cuba CP 54 830 Tel: 53 42200124, e-mail: info@ibp.co.cu

Licencia Creative Commons
Biotecnología Vegetal
está bajo una Licencia Creative Commons Atribución-NoComercial 4.0 Internacional.