Transformación genética mediada por Agrobacterium tumefaciens de suspensiones celulares embriogénicas de banano cultivar Grande naine (AAA)

Idalmis Bermúdez-Caraballoso, Rafael Gómez-Kosky, Borys Chong, Maritza Reyes, José M. Machado, Orelvis Portal, Bárbara Ocaña, Yelenys Alvarado-Capó, Michel Leiva-Mora, Mayra Acosta-Suárez, Mileidy Cruz-Martín, Belkis Roque, Rony Swennen, Laszlo Sagi, Lázaro Hernández

Resumen


La Sigatoka negra (Mycosphaerella fijiensis Morelet) se ha convertido en los últimos años, en la enfermedad foliar más destructiva que afecta el cultivo de bananos y plátanos a nivel mundial. El presente trabajo se realizó con el objetivo de obtener plantas transgénicas de banano cultivar Grande naine resistentes a esta enfermedad mediante la transformación genética. Se emplearon suspensiones celulares embriogénicas, obtenidas a partir de embriones somáticos formados de flores masculinas inmaduras, para realizar la transformación mediada por Agrobacterium tumefaciens. Se empleó la cepa EHA-105 de la bacteria con los plásmidos binarios pHCA-58, pHCG-59 y pHGA-91, estos contienen diferentes combinaciones de genes que codifican para las enzimas antifúngicas: quitinasa, glucanasa y la osmotina AP-24. Como marcador de selección fue empleado el herbicida comercial BASTA®. Se obtuvieron 110 posibles líneas transformadas de las tres construcciones, luego de tres meses en medio de cultivo de selección. El evento de transgénesis fue comprobado mediante análisis de reacción en cadena de la polimerasa.

Palabras clave: AP-24, glucanasa, Musa, Mycosphaerella fijiensis, quitinasa


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