Transformación genética mediante Agrobacterium tumefaciens en híbrido de papaya a partir de ápices de plantas in vitro

Resumen

En el cultivo de la papaya (Carica papaya L.) las afectaciones por virus disminuyen en más de un 50% la producción de las plantaciones. La transformación genética constituye una vía alternativa para la obtención de nuevas variedades resistentes a este patógeno. El principal objetivo del presente trabajo fue desarrollar una metodología para la transformación de un híbrido de papaya mediante A. tumefaciens. Como material vegetal se utilizaron ápices (3-5 mm) de plantas in vitro de papaya. Se emplearon las cepas de Agrobacterium tumefaciens EHA-105 y AT 22-60 que contenían el plásmido pCAMBIA 3301. Se establecieron las condiciones de co-cultivo para lograr una integración del gen foráneo en el genoma del híbrido. La integración de la secuencia transgen fue confirmada por la expresión del gen GUS en tejidos de los explantes mediante el ensayohistoquímico.Selogrólamayorexpresióntransitoriadela β--glucuronidasaenlosápicesco-cultivados a 28⁰C durante cinco días utilizando la cepa EHA 105 con una frecuencia de 20 puntos azules como promedio por ápice infestado. Fue posible eliminar las quimeras luego del cuarto subcultivo después de la transformación y las líneas obtenidas fueron resistentes a BASTA®. El resultado final demostró que es posible obtener plantas transformadas del híbrido de papaya a partir de sus ápices meristemáticos.

Palabras clave: Carica papaya, genes, gus, plásmido