Efecto de los agentes selectivos kanamicina y sulfadiacina sobre el proceso de embriogénesis somática en Coffea arabica cv. Caturra rojo

Resumen

Se estudió el efecto de kanamicina y sulfadiacina como marcadores de selección en la primera fase de la transformación genética del cafeto (Coffea arabica). Se emplearon suspensiones celulares embriogénicas de cafeto de la variedad Caturra rojo. En la fase de diferenciación de los embriones somáticos se realizó la selección en medio de cultivo líquido con una densidad de 0.5 gramos de masa fresca por litro (gMF.l^-1) y en medio de cultivo semisólido se colocaron grupos de agregados celulares con una masa fresca de 50 mg por placa de Petri. En la germinación se utilizaron embriones somáticos en etapa de torpedo. Los agentes selectivos empleados fueron kanamicina (25, 50 y 100 mg.^-1) y sulfadiacina (10, 20 y 30 mg.l^-1). Se evaluó la masa fresca y el número de embriones somáticos para la fase de diferenciación y en la fase de germinación el número de embriones somáticos germinados. En la diferenciación se observó que los tratamientos con kanamicina tanto en medio de cultivo líquido como semisólido, se presentó multiplicación de los agregados celulares y formación de embriones somáticos. Sin embargo, con el empleo de la sulfadiacina a partir de la concentración miníma de 10 mg.l^-1 se apreció un efecto inhibitorio sobre los agregados celulares en medio de cultivo líquido y semisólido. En la fase de germinación, la supervivencia de los embriones somáticos colocados en medio de cultivo con kanamicina fue 45.7% con una germinación entre 28.5 y 34.1% con respecto al control que tuvo un 71% de supervivencia y una germinación de 37.1%. En el caso de la sulfadiacina en la fase de germinación, aunque hubo supervivencia en las concentraciones de 10 y 20 mg.l^-1 con valores entre 11.4 y 5.7% respectivamente, no se logró la germinación total de los embriones somáticos. Con 30 mg.l^-1 de sulfadiacina hubo una inhibición total de la germinación y mortalidad de los embriones somáticos.

Palabras clave: agente selectivo, embrión somático, germinación, suspensión celular