Cuantificación del crecimiento in vitro de Mycosphaerella fijiensis mediante lecturas de absorbancia

Resumen

El crecimiento lento de Mycosphaerella fijiensis Morelet en medios de cultivo sintéticos y semi-sintéticos así como las características de sus colonias hacen que el uso de los métodos tradicionales de evaluación del crecimiento fúngic o sean inadecuados y poco factibles. Por ello, se requiere de un método que permita cuantificar su crecimiento en volúmenes reducidos de sustancias y en cortos periodos de tiempo. El objetivo de este trabajo fue cuantificar el crecimiento de M. fijiensis a través lecturas de absorbancia, en el tiempo, de suspensiones miceliales obtenidas de cultivos en medio líquido. Se comparó la masa seca del micelio de este patógeno crecido en medio de cultivo líquido en frascos de 250 ml de capacidad y la absorbancia en placas de 96 pocillos. Similar procedimiento se empleó para evaluar el efecto de filtrados de cultivo bacterianos con actividad antifúngica in vitro frente a M. fijiensis. Se encontró una relación lineal entre la absorbancia a 595 nm del crecimiento fúngico en medio de cultivo líquido con respecto a la masa seca. Mediante lecturas de absorbancia en placas de 96 pocillos fue posible cuantificar el crecimiento de suspensiones miceliales M. fijiensis en medio de cultivo líquido. Además, pudo ser aplicado para evaluar la inhibición del crecimiento del patógeno por filtrados de cultivo bacterianos con resultados a las 48 h de incubación.

Palabras clave: actividad antifúngica, biomasa, DO₅₉₅