Efecto del daño con carborundum en la regeneración y expresión transitoria de ß-glucuronidasa en diferentes explantes de Phaseolus vulgaris var. CIAP 7247
Resumen
El frijol, presenta serias dificultades para la transformación genética vía Agrobacterium tumefaciens, su eficiencia puede aumentar si se realiza una adecuada preparación del explante para la infección. Con el objetivo de determinar el efecto del tratamiento con carborundum a nudos cotiledonales y callos organogénicos de Phaseolus vulgaris var. CIAP 7247, en la regeneración y en la expresión transitoria de â-glucuronidasa, se realizó este trabajo. A los tres días de germinadas las semillas maduras se tomó un segmento de tallo de 5-6 mm de longitud con el nudo cotiledonal. Para los callos organogénicos se emplearon fragmentos de 4-5 mm de diámetro, a los siete días del tercer subcultivo. Se conformaron cinco tratamientos con diferentes tiempos de aplicación del carborundum (0, 0.5, 1.0, 1.5 y 2.0 minutos). Los resultados mostraron que la aplicación de una solución de carborundum (0.5g/30ml de agua estéril) en agitación, produjo daños sobre los dos tipos de explantes empleados. Estos resultados permitieron concluir que la aplicación del carborundum durante 1.5 minutos, logró la regeneración de yemas múltiples en al menos un lado del nudo cotiledonal y como promedio 9.68 puntos azules. Sin embargo, en callos organogénicos con el tratamiento por 1.0 minuto, se logró aumentar el número de puntos azules mayores de 1.0 mm sin afectar la posterior regeneración en plantas de los tejidos transformados en esta variedad de frijol.
Palabras clave: callos, frijol, transformación genética
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