Obtención de callos con estructuras embriogénicas de Stevia rebaudiana Bert. en medios de cultivo semisólidos

Resumen

El ajuste de un protocolo eficiente de embriogénesis somática en Stevia rebaudiana Bertoni serviría de apoyo a programas de mejoramiento genético por transformación genética, sobre lo cual existen hasta el momento muy pocos resultados en esta especie. Por estas razones, el objetivo de este trabajo fue obtener callos con estructuras embriogénicas de clones de yerba dulce a partir de plantas in vitro. Para la formación de callos se estudiaron variables como: el tipo de explante, condiciones de incubación e influencia del genotipo. Se empleó el medio de cultivo MS con diferentes reguladores de crecimiento solos o en combinación (2,4-D; 6-BAP; TDZ). Los callos fueron multiplicados en los mejores medios de cultivo y posteriormente fueron subcultivados a medios de cultivo que contenían 2,4-D o TDZ con 40 y 60 g.l^-1 de sacarosa para inducir la formación de masas proembriogénicas. Se logró la formación de callos, luego de 45 días de cultivo en la oscuridad en medios de cultivo con 2.26 μM de 2,4-D y 2.22 μM de 6-BAP ó 1.13 μM de 2,4-D y 0.45 μM de TDZ, con el empleo de explantes foliares de plantas in vitro de yerba dulce. La multiplicación fue posible realizarla en los mismos medios de cultivo de formación de callos. Al subcultivarlos a medios de cultivo con 0.45 μM de 2,4-D más la adición de 40 g.l^-1 de sacarosa se obtuvo la mayor cantidad de callos con desarrollo de masas proembriogénicas luego de 45-50 días de cultivo.

Palabras clave: cultivo in vitro, explantes foliares, yerba dulce