Construcción y secuenciación parcial de una biblioteca sustractiva en Calcutta 4 (Musa AA) en estadio temprano de infección con Mycosphaerella fijiensis Morelet

Resumen

El estudio de los genes involucrados en la respuesta de defensa en la planta contra el ataque de patógenos, es uno de los pasos más importantes para la elucidación de los mecanismos moleculares de resistencia a enfermedades. La generación de bibliotecas sustractivas de ácido desoxirribonucleico complementario (ADNc), por medio de la técnica de hibridación sustractiva por supresión, ha sido utilizada para este propósito. En este trabajo se realizó una hibridación sustractiva, entre el ADNc obtenido de hojas de ‘Calcutta 4’ inoculadas con M. fijiensis (CCIBP-Pf83) y una mezcla de ADNc de hojas de ‘Calcutta 4’ no inoculadas y del micelio del hongo. Las muestras de hojas se tomaron a los 6, 10 y 12 días posteriores a la inoculación. La biblioteca sustractiva se obtuvo por clonación y transformación de los productos sustraídos y como resultado se obtuvieron 600 clones recombinantes. El análisis de secuencia de 69 clones reveló redundancia de las secuencias blanco expresadas, la mayoría no mostró homología con secuencias en las bases de datos. El 13 % tuvo alta homología con metalotioninas. Los resultados constituyen un paso de avance en el estudio a nivel molecular de la interacción Musa- Mycosphaerella fijiensis.

Palabras clave: hibridación sustractiva por supresión, interacción Banano-Mycosphaerella fijiensis, Musa spp., Sigatoka negra