Metodología para el diagnóstico molecular del Virus del Mosaico de la Malanga para la certificación de plantas in vitro de clones comerciales de malanga
Resumen
La propagación acelerada de clones de malanga (Xanthosoma spp.) y (Colocasia esculenta L.) a través de técnicas biotecnológicas ha generado una gran demanda de líneas saneadas especialmente al Virus del Mosaico de la Malanga. Este patógeno perteneciente al grupo de los potivirus constituye el agente causal de la enfermedad viral más importante del cultivo que causa pérdidas de hasta un 40% en clones comerciales. El diagnóstico inmunoquímico utilizado en los programas de certificación masiva, con grandes ventajas sobre otros tipos de análisis, tiene un límite de sensibilidad que puede permitir escape de material vegetal contaminado. Con la introducción de técnicas moleculares de diagnóstico se pueden detectar pequeñas concentraciones virales en plantas in vitro. En el presente trabajo se realiza la detección del Virus del Mosaico de la Malanga mediante la utilización de la técnica de reverso transcripción seguida por la reacción en cadena de la polimerasa. Se validó la metodología establecida y se certificaron líneas plantas in vitro de malanga que serán usadas en procesos de micropropagación en biofábricas.
Palabras clave: Colocasia, DMV, plantas sanas, RT-PCR, Xanthosoma
Referencias
Aleman-Verdaguer, ME, Goudou-Urbino C, Dubern J, Beachy R, y Fauquet C (1997) Analysis of the sequence diversity of the P1, HC, P3 NIb and CP genomic regions of several Yam mosaic potyvirus isolates: implications for the intraspecies molecular diversity of Potyviruses. Journal of General Virology 78: 1253-1564
Bousalem, M, Douzery EJP y Fargette D (2000) High genetic diversity, distant phylogenetic relationships and intraspecies recombination events among natural populations of Yam mosaic virus: a contribution to understanding Potyvirus evolution. Journal of General Virology 81: 243-255
García M, Mederos V, Rodríguez S, López J, Ventura J, Cabrera M, Hernández R, Gonzáles JE, Bermúdez D, Gálvez D, Gutiérrez V y Gálvez JR (1999) Generalización de la metodología para la micropropagación de la malanga (Xanthosoma spp.) en Cuba. En: 5to Coloquio Internacional de Biotecnología Vegetal, pp 167-169. Santa Clara
Hernández, R, Bermúdez D, González JE, Machado JM, Pairol A y García M (2000). Establecimiento de un sistema de diagnóstico por UM-ELISA para DMV en Aráceas. Certificación de vitroplantas de
generosa comerciales para la introducción en biofábricas. Centro Agrícola
Hernández PR, Bertrand H, Lepoivre P, González JE, Rojas X, Pairol A, González Y, González G y Cortés C (2002) Diagnostico y saneamiento de Banana Streak Virus (BSV) en Musa spp. Centro Agrícola 2: 42-47
Jacob, T y Usha R (2001) 3’-terminal sequence analysis of the RNA genome of the Indian isolate of Cardamom mosaic virus: A new member of the genus Macluravirus of Potyviridae. Virus Genes 23 (1): 81-88
Jones, A.T., McGavin, W.J., Geering, A.D.W. and Lockhart, B.E.L. (2001). A new Badnavirus in Ribes species, its detection by PCR, and its close association with Goosberry vein banding disease. Plant Disease 85 (4): 417-422
Oruetxebarria, I y Valkonen JPT (2001) Analysis of the P1 gene sequences and the 3'-terminal sequences and secondary structures of the single-stranded RNA genome of Potato Virus V. Virus Genes 22 (3): 335-343
Pappu, SS, Brand R, Pappu HR, Rybicki EP, Gough KH, Frenkel MJ y Niblett CL (1993) A polymerase chain reaction method adapted for selective amplification and cloning of 3´ sequences of potyviral genomes: application to dasheen mosaic virus. Journal of Virological Methods 43 (2): 267
Pappu, SS, Pappu HR, Rybicki EP, y Niblett CL (1994). Unusual amino terminal sequence characterizes the coat protein of dasheen mosaic potyvirus. Journal of GeneralVirology 75: 239-242
Peralta EL y Villoch A (1999) Metodología para la validación de ensayos inmunoquímicos y moleculares utilizados en el diagnóstico de fitopatógenos. En: X Congreso Latinoamericano de Fitopatógenos. No. 153. Guadalajara, México
Shukla, DD, y Ward CW (1989) Identification and classification of Potyviruses on the basis of coat protein sequence data and serology. Archive of Virology 106: 171-200
Copyright (c) 2016 Biotecnología Vegetal
Biotecnología Vegetal eISSN 2074-8647, RNPS: 2154. ISSN 1609-1841, RNPS: 0397 Editada por: Instituto de Biotecnología de las Plantas. Universidad Central Marta Abreu de Las Villas. Carretera a Camajuaní km 5.5, Santa Clara, Villa Clara, Cuba CP 54 830 Tel: 53 42200124, e-mail: info@ibp.co.cu
Biotecnología Vegetal está bajo una Licencia Creative Commons Atribución-NoComercial 4.0 Internacional.