Regeneración de plantas de Lavandula angustifolia L. a partir de callos formados de explantes de hojas in vitro como estrategia de conservación
Resumen
Lavandula angustifolia L. es una hierba aromática y medicinal con múltiples aplicaciones industriales. Sin embargo, la sobreexplotación de las plantaciones silvestres atenta contra su conservación como recurso natural. El objetivo de este trabajo fue regenerar plantas de L. angustifolia a partir de explantes foliares in vitro mediante organogénesis indirecta como estrategia de conservación. Se cultivaron secciones de hojas de plantas in vitro en MS con 6-bencilamino purina (BAP) combinada con ácido naftalen acético (ANA) o ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) para inducir la formación de callos. El crecimiento de los callos se clasificó en tres tipos de acuerdo con el área de explante cubierta por el callo y se determinó la masa fresca y seca (mg) por callo. Luego, se subcultivaron los callos en MS con BAP y Kinetina (Kn) combinados con ANA o 2,4-D para la regeneración de los brotes. Los brotes se cultivaron en MS con 8.88 µM de BAP, 4.92 µM de ácido indol butírico (AIB) y 2.68 µM de ANA para su enraizamiento. Las plántulas se aclimatizaron y después de 50 días de endurecimiento se transfirieron a suelo. Los explantes en todos los tratamientos formaron callos. El mayor porcentaje de formación de callos con crecimiento abundante se logró en MS con 8.88 µM de BAP + 5.36 µM de ANA (92%). En MS con 4.44 µM de BAP + 4.64 µM de Kn + 2.68 µM de ANA, el 93% de los callos regeneraron brotes y se obtuvieron de 25-30 brotes múltiples después de 63 días de subcultivo. Los brotes desarrollaron raíces y las plantas se aclimatizaron con éxito con un alto porcentaje de supervivencia 93% La hoja in vitro de L. angustifolia es un explante adecuado para la regeneración de plantas.
Palabras clave
Referencias
Andrys D, Adaszyńska-Skwirzyńska M, Kulpa D (2018) Essential oil obtained from micropropagated lavender, its effect on HSF cells and application in cosmetic emulsion as a natural protective substance. Nat Prod Res 32(7): 849-853
Anjusha S, Gangaprasad A (2017) Callus culture and in vitro production of anthraquinone in Gynochth odesumbellata (L.) Razafim. & B. Bremer (Rubiaceae). Industrial Crops and Products 95: 608-614; doi: 10.1016/j.indcrop.2016.11.021
Cavanagh HM, Wilkinson JN (2002) Biological activities of lavender essential oil.Phytother Res 16: 301-308
De Bona CM, Reinhart V, Biasi LA, Zanette F (2011) Lavandula dentata and Lavandula angustifolia in vitro organogenesis. Plant Cell Cult Micropropag 7(2): 66-70
Dronne S, Jullien F, Caissard JC, Faure O (1999) A Simple and efficient method for in vitro shoot regeneration from leaves of Lavandin (Lavandula x intermedia Emeric ex Loiseleur). Plant Cell Report 18: 429-433
Falk L, Biswas K, Boeckelmann A, Lane A, Mahmoud SS (2009) An efficient method for the micropropagation of lavenders: regeneration of a unique mutant. J Essent Oil Res21: 225-228
Frankham R, Ballou JD, Briscoe DA (2002) Introduction to Conservation Genetics. Cambridge University Press, London
Gonçalves S, Romano A (2012) In vitro culture of lavenders (Lavandula spp.) and the production of secondary metabolites. Biotechnol Adv 31: 166–174; doi: 10.1016/j.biotechadv.2012.09.006
Guadarrama-Flores B, Buendía-González L, Orozco-VillaFuerte J, Estrada-Zúñiga ME, Cruz-Sosa F (2012) Producción en cultivos in vitro de los componentes principales del aceite esencial de Lavandula angustifolia. Rev Latinoamer Quím 40(2): 65-73
Hajhashemi V, Ghannadi A, Sharif B (2003) Anti-inflammatory and analgesic properties of the leaf extracts and essential oil of Lavandula angustifolia Mill. J Ethnopharmacol 89: 67-71
Janarthanam B, Seshadri S (2008) Plantlet regeneration from leaf derived callus of Vanilla planifolia Andr. In Vitro Cell Dev Biol Plant 44: 84–89; doi: 10.1007/s11627-008-9123-4
Leelavathi D (2010) Ex–situ conservation of Lavandula angustifolia using in vitro techniques. Wetlands, Biodiversity and change, Bangalore
Leelavathi D, Kuppan N (2013) Protocol for rapid clonal multiplication using in vitro apical bud of Lavandula angustifolia IOSR Journal Of Pharmacy And Biological Sciences 7(3): 96-98
Miclea I, Chifor R (2018) Germination, in vitro propagation and acclimatization in Lavandula angustifolia. Bull UASVM Anim Sci Biotechnol 75: 106-109; doi: 10.15835/buasvmcn-asb:2018.0017
Murashige T, Skoog F (1962) A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures. Physiol Plant 15: 473-97
Nobre J (1996) In vitro cloning and micropropagation of Lavandula stoechas from field-grown plants. Plant Cell Tissue Organ Cult 46: 151-155
Parkash V, Singh H (2013) Lavandula angustifolia L. (Lavender): an important aromatic medicinal shrub and its in vitro micro-propagation for conservation. Journal of Agricultural Technology 9(3): 91-702
Rana N, Khadka S, Rajbahak S (2018) In vitro propagation of Lavender (Lavandula angustifolia Mill.). J Pl Res 16(1): 112-118
Segura J, Calvo MC (1991) Lavandula spp. (Lavender): in vitro culture, regeneration of plants, and the formation of essential oils and pigments. In: Bajaj YPS (Eds.) Biotechnology in Agriculture and Forestry, pp. 283-310, Springer Cham, Dordrech
Tsuro M, Koda M, Inoue M (2000) Efficient plant regeneration from multiple shoots formed in the leaf-derived callus of Lavandula vera, using the open culture system. SciHort 86: 81-88
Yegorova NA, Mitrofanova IV, Brailkoa VA, Grebennikovaa OA, Paliya AE, Stavtseva IV (2019) Morphogenetic, Physiological, and Biochemical Features of Lavandula angustifolia at Long-Term micropropagation in vitro. Russian Journal of Plant Physiology 66(2): 326-334
Zuzarte MR, Dinis AM, Cavaleiro C, Salgueiro LR, Canhoto JM (2010) Trichomes, essential oils and in vitro propagation of Lavandula pedunculata (Lamiaceae). Ind Crop Prod 32: 580-587
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