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Efecto de parámetros que intervienen en la transformación vía Agrobacterium tumefaciens en la regeneración de Phaseolus vulgaris L. cultivares 'ICA Pijao' y 'BAT 93'
Resumen
Phaseolus vulgaris L. es un cultivo muy empleado en el consumo humano. Su producción se encuentra afectada por la incidencia de factores bióticos y abióticos. La transformación genética brinda la posibilidad de reducir estas afectaciones, pero la baja eficiencia en la regeneración in vitro constituye una limitante para el desarrollo de protocolos para la obtención de plantas transformadas en esta especie. El objetivo de este trabajo fue determinar el efecto de la concentración de la suspensión bacteriana, el tiempo de infiltración por vacío y de co-cultivo en la regeneración de brotes de P. vulgaris en los cultivares 'ICA Pijao' y 'BAT 93'. Callos nodulares verdes se inocularon con una suspensión de A. tumefaciens ajustada a DO600 de 0.1, 0.2 y 0.3. Se evaluaron tres tiempos de infiltración por vacío: 1, 2 y 3 min y tiempos de co-cultivo de tres y cinco días. La concentración de la suspensión bacteriana, el tiempo de infiltración por vacío y el período de co-cultivo afectan la regeneración de brotes de P. vulgaris cv. 'ICA Pijao' y 'BAT 93'. Los mayores porcentajes de regeneración de brotes de P. vulgaris se lograron al inocular los callos con una suspensión bacteriana ajustada a DO600=0.1, sin infiltración con vacío y 3 días en co-cultivo. Los resultados de esta investigación constituyen los primeros aportes a la comunidad científica en demostrar el efecto de la infiltración por vacío en la regeneración de tejido de P. vulgaris inoculado con A. tumefaciens.
Palabras clave: co-cultivo, infiltración por vacío, regeneración, suspensión bacteriana
Referencias
Chandel SCR, Pandey SK (2014) Effect of N6-benzylaminopurine and adenine sulphate in in-vitro plant regeneration of Phaseolus vulgaris L. International Journal of Current Microbiology and Applied Sciences 3(12): 801-806
Collado R, Bermúdez-Caraballoso I, García LR, Veitía N, Torres D, Romero C, Martirena-Ramírez A, Angenon G (2015) Agrobacterium-mediated transformation of Phaseolus vulgaris L. using indirect organogenesis. Scientia Horticulturae 95: 89-100; doi: 10.1016/j.scienta.2015.06.046
Collado R, Veitía N, Bermúdez-Caraballoso I, García L, Torres D, Romero C, Lorenzo J, Angenon G (2013) Efficient in vitro plant regeneration via indirect organogenesis for different common bean cultivars. Scientia Horticulturae 153: 109-116; doi: 10.1016/j.scienta.2013.02.007
Espinosa-Huerta E, Quintero-Jiménez A, Cabrera-Becerra KV, Mora-Avilés MA (2013) Stable and efficient Agrobacterium tumefaciens mediated transformation of Phaseolus vulgaris. Agrociencia 47(4): 319-333
Gamborg OL, Miller RA, Ojima K (1969) Nutrient requirements of suspension cultures of soybean root cells. Experimental Cell Research 50: 151-158; doi: 10.1016/0014-4827 (68)90403-5
Kwapata K, Nguyen T, Sticklen M (2012) Genetic transformation of common bean (Phaseolus vulgaris L.) with the Gus color marker, the Bar herbicide resistance, and the Barley (Hordeum vulgare) HVA1 drought tolerance genes. International Journal of Agronomy 2012: 1-8; doi: 10.1155/2012/198960
Lanna AC, Taeko S, Gledson T, Pereira R, Alves M (2016) Physiological characterization of common bean (Phaseolus vulgaris L.) genotypes, water-stress induced with contrasting response towards drought. Australian Journal of Crop Science 10(1): 1-6
Liu Z, Park BJ, Kanno A, Kameya T (2005) The novel use of a combination of sonication and vacuum infiltration in Agrobacterium-mediated transformation of kidney bean (Phaseolus vulgaris L.) with lea gene. Molecular Breeding 16(3): 189-197; doi: 10.1007/s11032-005-6616-2
Martirena-Ramírez A, Veitía N (2013) Factores que influyen en la transformación genética vía Agrobacterium tumefaciens en Phaseolus vulgaris L. Biotecnología Vegetal 13(2): 67-74
Mukeshimana G, Ma Y, Walworth AE, Song G, Kelly JD (2013) Factors influencing regeneration and Agrobacterium tumefaciens mediated transformation of common bean (Phaseolus vulgaris L.). Plant Biotechnology Reports 7(1): 59-70; doi: 10.1007/s11816-012-0237-0
Nanjareddy K, Arthikala MK, Blanco L, Arellano ES, Lara M (2016) Protoplast isolation, transient transformation of leaf mesophyll protoplasts and improved Agrobacterium-mediated leaf disc infiltration of Phaseolus vulgaris: tools for rapid gene expression analysis. BMC Biotechnology 16(1): 53-66; doi: 10.1186/s12896-016-0283-8
Subramanyam K, Subramanyam K, Sailaja KV, Srinivasulu M, Lakshmidevi K (2011) Highly efficient Agrobacterium-mediated transformation of banana cv. Rasthali (AAB) via sonication and vacuum infiltration. Plant Cell Reports 30(3): 425-436; doi: 10.1007/s00299-011-1010-5
Zambre M, Goossens A, Cardona C, Van Montagu M, Terryn N, Angenon G (2005) A reproducible genetic transformation system for cultivated Phaseolus acutifolius (tepary bean) and its use to assess the role of arcelins in resistance to the Mexican bean weevil. Theoretical and Applied Genetics 110(5): 914-924; doi: 10.1007/s00122-004-1910-7
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