Extracción in situ de ADN genómico para el análisis por PCR de regiones de interés en cuatro especies vegetales y un hongo filamentoso

Resumen

Los métodos de extracción de ADN genómico son generalmente trabajosos y peligrosos para la salud humana y el medio ambiente por el uso de solventes orgánicos (cloroformo y fenol). En este trabajo se valida un protocolo de extracción in situ de ADN genómico por lisis alcalina. Se empleó con el objetivo de amplificar regiones del ADN en cuatro especies de plantas y de un hongo mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Se utilizó material vegetal de Saccharum officinarum L., Carica papaya L., Digitalis purpurea L. de los cuales se logró extender diferentes regiones del genoma a través de PCR. Fue posible amplificar un fragmento del gen avr-4 de ADN purificado a partir de micelio liofilizado de Mycosphaerella fijiensis Morelet. Adicionalmente, se logró amplificar la región del transgen ap24 insertado en el genoma de banano cv. `Grande naine' (Musa AAA).

Palabras clave: Carica papaya L., Digitalis purpurea L., lisis alcalina, Musa, Saccharum officinarum L.